Perplexityに聞きました : 3D in vitro IPFモデルの具体的な構築方法は

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3D in vitro IPFモデルの具体的な構築方法について、以下の情報を基に説明します。

3D in vitro IPFモデルの構築方法

概要

3D in vitroモデルは、IPFの病態を再現するために開発されており、細胞間の相互作用や線維化の進行を研究するための有用なツールです。

構築手順

1. 細胞の準備:
   • 肺胞上皮細胞（AT2細胞）: マウス肺組織から単離したAT2細胞を使用します。
   • 間質細胞: 肺間充織細胞（線維芽細胞やニッチ細胞）を用意します。
2. 3D培養:
   • AT2細胞と間質細胞をマトリゲル中で3D培養します。この環境で、AT2細胞はスフェア状に成長し、その内側に分化した1型肺胞上皮細胞（AT1細胞）が出現します。
3. オルガノイドの形成:
   • 上記の細胞を用いて、肺胞オルガノイドを形成します。これは、肺胞組織の構成細胞が封入されたスフェアであり、in vivoの肺組織に近い構造を持ちます。
4. 線維化の誘導:
   • オルガノイドにブレオマイシンを処理することで、TGF-β1やPDGF-Aの遺伝子発現を顕著に上昇させ、線維化を誘導します。
5. 評価と解析:
   • 線維化の進行を定量化し、各細胞の相互作用を解析します。特に、TGF-βやPDGF-Aの分泌を測定し、線維化の貢献度を評価します。

この方法により、IPFの病態をin vitroで再現し、治療標的の探索や薬剤スクリーニングに活用することができます 。

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